觸(chù)酶試(shì)驗(yàn)是(shì)關於觸(chù)酶的(dí)一個實驗(yàn)做法(fǎ)。大(dà)多(duō)需氧(yǎng)和兼(jiān)性厭氧(yǎng)菌(jūn)均產(chǎn)生*酶(méi)，但鏈球菌(jūn)屬陰(yīn)性，故常用此(cǐ)試驗來(lái)鑒定(dìng)。分枝(zhī)杆(gān)菌的鑒別(bié)則(zé)用(yòng)耐熱觸(chù)酶(méi)試(shì)驗(yàn)，結核分枝杆菌為(wéi)陰性，戈(gē)氏(shì)分枝(zhī)杆菌和地分(fēn)枝杆菌(jūn)為陽(yáng)性(xìng)。
 

　　觸(chù)酶試驗酶(méi)液的製備：

 

　　1.稱取(qǔ)葉片(piàn) 0.25g ，加入5倍量(liáng)的(M/V)pH7.0 的(dí)PBS冰浴(yù)研(yán)磨 15000r/min
 

　　離心15min取部(bù)分(fēn)上(shàng)清液經適當稀釋(shì)後用(yòng)於酶活(huó)性測(cè)定。
 

　　2.CAT活性的(dí)測定(dìng)
 

　　在3ml的(dí)反(fǎn)應(yīng)體係(xì)中，包括0.3% H2021ml, H20 1.95ml, 最後加入0.05ml酶(méi)液
 

　　啟(qǐ)動反應(yīng)，測定(dìng)波(bō)長240nm處的(dí)OD降(jiàng)低(dī)速(sù)度。將每分鐘(zhōng)OD減少0.01定義(yì)為1個活力單位(wèi)。
 

　　3.POD活(huó)性的測(cè)定
 

　　在(zài)3ml的(dí)反應體係(xì)中(zhōng)，包括0.3% H2021ml, .0.2% 愈創(chuàng)木酚(fēn)0.95ml,pH7.0的(dí)PBS 1ml，最後(hòu)加(jiā)入0.05ml酶液啟(qǐ)動(dòng)反(fǎn)應，記(jì)錄470nm處(chǔ)OD增(zēng)加速(sù)度。將(jiāng)每分鐘OD增(zēng)加0.01定義(yì)為(wéi)1個活力單位。
 

　　4. 用(yòng)考馬(mǎ)斯亮(liàng)藍(lán) G-250法測(cè)定(dìng)蛋白(bái)含(hán)量(liáng)。