還不了解大腸(cháng)杆菌(jūn)顯(xiǎn)色培(péi)養基(jī)的可以(yǐ)進(jìn)來看(kàn)看
大(dà)腸(cháng)杆菌顯色培養基較(jiào)傳統(tǒng)使(shǐ)用(yòng)的(dí)SMAC培養(yǎng)方法,特異(yì)性和靈敏度(dù)更高(gāo),用於(yú)從(cóng)臨床和非(fēi)臨床樣(yàng)品(pǐn)中(zhōng)選擇性分離產(chǎn)誌賀(hè)毒素的大(dà)腸(cháng)杆(gān)菌,如臨(lín)床樣本(běn)(糞便(biàn)),食品和乳品(pǐn)樣本(běn)等(děng)。
大腸杆菌顯(xiǎn)色培養(yǎng)基中(zhōng)的蛋(dàn)白腖和酵母提取(qǔ)物提(tí)供(gōng)氮(dàn)源和(hé)碳(tàn)源(yuán)化合物(wù),長鏈氨(ān)基酸,維生素(sù)和(hé)其他必(bì)需(xū)營養素;緩衝鹽(yán)提供(gōng)緩衝作用(yòng);選(xuǎn)擇性添加(jiā)劑(jì)抑(yì)製革(gé)蘭氏(shì)陽(yáng)性菌和其(qí)他汙染菌群的生長(cháng)。混(hùn)合(hé)顯(xiǎn)色劑使產(chǎn)誌(zhì)賀毒素大腸杆(gān)菌(jūn)菌落呈紫(zǐ)紅(hóng)色(sè)至紫色。產誌賀毒(dú)素的大腸杆(gān)菌O157通常(cháng)不發(fā)出熒光,而產誌(zhì)賀毒(dú)素(sù)大腸(cháng)杆菌(jūn)非O157血清型是(shì)發(fā)熒(yíng)光的(dí)(少數(shù)可能(néng)不發光)。其(qí)他腸(cháng)杆菌科(kē)菌落顯(xiǎn)示為無(wú)色(sè)或(huò)藍(lán)色或(huò)被抑製。由(yóu)於(yú)產誌(zhì)賀毒素(sù)大腸(cháng)杆菌血(xiě)清(qīng)型復(fù)雜,且(qiě)可能存在抗(kàng)生素作(zuò)用產(chǎn)生的變異型,大腸(cháng)杆菌顯(xiǎn)色培養基(jī)對(duì)於(yú)產誌賀毒素(sù)大腸杆菌還需要(yào)進行生化(huà)和血(xiě)清(qīng)學(xué)檢驗以確認鑒定(dìng)結果。
大腸(cháng)杆(gān)菌顯色培(péi)養基(jī)的實驗(yàn)原(yuán)理(lǐ):
蛋(dàn)白(bái)腖提供(gōng)碳源和氮源(yuán);膽(dǎn)鹽抑製(zhì)革蘭氏(shì)陽性菌的(dí)生(shēng)長;氯(lǜ)化(huà)鈉可(kě)維(wéi)持均衡的(dí)滲透(tòu)壓(yā);瓊脂(zhī)是培(péi)養基(jī)的凝(níng)固劑(jì);混(hùn)合碳(tàn)水(shuǐ)化合(hé)物為(wéi)可(kě)發酵的糖類;中性紅(hóng)是pH指示劑,細菌發酵糖(táng)產酸時菌(jūn)落(là)呈桃紅(hóng)色(sè);亞碲酸鉀抑(yì)製(zhì)非大腸杆菌O157:H7菌的(dí)生長;混合(hé)色(sè)素與大腸杆菌O157:H7所具(jù)有的酶(méi)發生特異性反應(yīng),水(shuǐ)解底(dǐ)物(wù),釋放出顯色基團,在(zài)淺(qiǎn)紅色平板上產生藍(lán)綠色(sè)的(dí)菌落(là)。
大腸(cháng)杆菌(jūn)顯(xiǎn)色培養(yǎng)基(jī)的用法:
稱(chēng)取本(běn)品 50.1g 加(jiā)入1000ml蒸(zhēng)餾水,加熱溶(róng)解(jiě)並不(bù)停攪拌(bàn),煮(zhǔ)沸(fèi)不(bù)要(yào)超過(guò)1分鐘。分(fēn)裝(zhuāng)三角(jiǎo)瓶,121℃高壓滅菌15分鐘。取1ml製備好的樣品液加(jiā)入(rù)直(zhí)徑(jìng)為9cm無菌(jūn)平皿中(zhōng)心(xīn),傾(qīng)入(rù)冷卻(què)至(zhì)45-50℃培(péi)養基約15ml,混(hùn)匀,凝固後,36±1℃倒置培(péi)養(yǎng)18~24h。或冷卻(què)至(zhì)45-50℃時(shí),傾入無(wú)菌平皿(mǐn),瓊(qióng)脂*凝(níng)固後,在37℃的培養箱中倒(dǎo)置放(fàng)置1-2小(xiǎo)時,加(jiā)入適當(dāng)稀釋度(dù)的樣(yàng)品液(yè)1ml,塗(tú)布於大腸杆(gān)菌(jūn)顯色培(péi)養基(jī)上(shàng),36±1℃培(péi)養18~24h。